شرح و توصيفي درباره آزمايش هاي تشخيصي بيماري يون در گاو :

مقدمه :

همانطور كه مي دانيم ، مشخص كردن عامل ايجاد كننده يك مشكل ، اغلب روندي آسان نيست . به خصوص اگر چندين عامل وجود داشته باشد كه مي توانند اين مشكل را ايجاد كنند . در چنين مواردي ، بايستي تمام عوامل ايجاد كننده مشكل را در نظر بگيريم . در حين اين كار ، يك سري از عوامل حذف مي شوند تا در انتها به پاسخ نهايي دست يابيم . دامپزشكان نيز براي مشخص كردن عامل ايجاد كننده يك بيماري ، از همين روش استفاده مي كنند . البته آزمايش هاي تشخيصي نيز جايز الخطاء هستند . معمولا ً دامپزشكان بر اساس نشانه هاي ذكر شده در مورد بيماري و يا علائم كلينيكي ، در ذهن خود ليستي از بيماري هايي كه مي توانند دليل عوارض ايجاد شده باشد تهيه مي كنند . كامل شدن تشخيص عامل بيماري ، مستلزم محدود شدن ليست ما به خود عامل بيماريزا است . بيماري هاي متعددي هستند كه در تشخيص بيماري يون ، مي توانند يكي ديگر از گزينه هاي ممكن باشند . در حالات بيماري يون در گاو ، ما به 10 بيماري ديگر مشكوك مي شويم و در چنين مواردي براي تشخيص قطعي ، از روش هاي تشخيص آزمايشگاهي استفاده مي كنيم . آزمايش هاي تشخيص بيماري يون ، مانند همانند تست هاي تشخيصي بيماري ايدز هستند و بر پايه وجود و يا عدم وجود عفونت استوار هستند . اين آزمايش ها به سه دسته تقسيم مي شوند :

1 - آزمايش هايي كه شواهد مستقيم نشان دهنده آلودگي را نشان مي دهند . بطور مثال جدا كردن عامل بيماري ( مايكو باكتريوم اويوم زير گونه پاراتوبركلوزيس ) با انجام كشت مدفوع .

2 - آزمايش هايي كه شواهد غير مستقيم نشان دهنده وجود آلودگي را نشان مي دهند . مثلا ً مشخص كردن وجود پادتن ضد مايكوباكتريوم اويوم زير گونه پاراتوبركلوزيس در خون ، كه با انجام انجام تست الايزا مشخص مي شود .

3 - آزمايش هايي كه شواهد ميكروسكوپي وجود واكنشي را عليه ميكروب نشان مي دهند ؛ مانند تهيه مقاطع بافتي از بافت روده .

به دليل اين كه آزمايش هاي تشخيصي بيماري يون بر حسب نوع ، به دو دسته آزمايش هاي مدفوع و تست هاي سرولوژيك هستند ، بنابراين روش انجام آزمايش ها نيز مي تواند بسيار متفاوت باشد . لذا وجود برنامه ملي آزمايشگاهي بيماري ها كه توسط سازمان ملي خدمات دامپزشكي (NVSL) تهيه مي شود الزامي است . براي تشخيص بيماري يون ، استفاده از آزمايش هاي كشت مدفوع ، AGID و الايزا (ELISA) ، توسط اين سازمان مورد تاييد قرار گرفته است . بنابراين ، وجود آزمايشگاهي تشخيصي كه توسط سازمان NVSL تاييد شده باشد و قادر به انجام آزمايشات مذكور باشد ، الزامي است .

دقت آزمايش هاي تشخيصي :

براي مشخص شدن دقت آزمايش هاي تشخيصي بيماري يون ، بايد به اين نكته توجه داشت كه سير كلي بيماري يون ، معمولا ً به 4 مرحله تقسيم مي شود : مرحله اول كه مرحله آلودگي اوليه است و با آزمايش هاي فعلي ، تشخيص داده نمي شود . در مرحله دوم ، حيوان حامل آلودگي ، هنوز علائم بيماري را نشان نمي دهد و هنوز آلوده بودن حيوان ، با بعضي از آزمايش ها ، مشخص نمي شود . مرحله سوم ، مرحله اي است كه در آن علائم كلينيكي بيماري مشخص مي شود . اما در مرحله چهارم كه مرحله انتهايي است ، آلوده بودن حيوان با تمام آزمايش هاي تشخيصي مشخص مي شود . بطور كلي ، اين روند را در بيماري يون ، به كوه يخ تشبيه كرده اند كه در آن مراحل 3 و 4 روي سطح آب هستند ( از نظر كلينيكي مشخص هستند ) و دو مرحله 1 و 2 ، در زير قرار دارند و با اين كه وجود دارند ، مشخص نيستند . به دليل اين كه اين آزمايش ها كاملا ً دقيق نيستند ، هنگامي كه اين آزمايش ها را در يك گله انجام مي دهيم ، حيوانات بر حسب بيماري حقيقي شان و وضعيت بيماري در آنها ، به يكي از چهار شكل زير ديده مي شوند :

الف : حيوانات آلوده كه نتيجه آزمايش آنها مثبت است .

ب : حيواناتي كه آلوده نيستند ، اما نتيجه آزمايش آنها مثبت است .

ج : حيوانات آلوده اي كه نتيجه آزمايش آنها منفي است .

د : حيوانات غير آلوده كه نتيجه آزمايش آنها منفي است .

جدول 1 : ارتباط بين نتايج آزمايش هاي تشخيصي و وضعيت حقيقي آلودگي حيوانات آزمايش شده :

ارتباط بين نتايج آزمايشهاي تشخيصي و وضعيت حقيقي آلودگي دام ها

روند واقعي بيماري

روند واقعي بيماري

نتيجه آزمايش

آلوده

غير آلوده

 

مثبت صحيح (گروه الف)‏

مثبت كاذب (گروه ب)‏

مثبت

منفي كاذب (گروه ج)‏

منفي صحيح (گروه د)‏

منفي   


براي يك آزمايش كه نتيجه آن مثبت بوده است دو احتمال وجود دارد : پاسخ هاي مثبت صحيح و پاسخ هاي مثبت كاذب . براي منفي بون يك آزمايش نيز دو احتمال وجود دارد : پاسخ هاي منفي صحيح و پاسخ هاي منفي كاذب . دقت آزمايش هاي تشخيصي ، بر پايه وضعيت آلودگي حقيقي حيوانات آزمايش شده استوار است . اين حالت را حساسيت و اختصاصيت آن آرمايش مي نامند . با بالا رفتن حساسيت و اختصاصيت يك آزمايش ، دقت آن آزمايش نيز بالا خواهد رفت .

حساسيت :

قدرت يك آزمايش براي پيدا نمودن حيوانات آلوده را حساسيت آن آزمايش مي نامند . حساسيت (Se) عبارتست از احتمال بروز پاسخ منفي آزمايش ، در مورد حيوانات عاري از آلودگي و يا احتمال مثبت بودن نتيجه آزمايش در مورد حيوانات آلوده . حساسيت را با بيان درصدي از حيوانات آلوده كه نتيجه آزمايش آنها مثبت بوده است (a/a+c) بيان مي كنند . در گله هاي آلوده ، با كمتر شدن حساسيت آزمايش هاي تشخيصي ، پاسخ هاي منفي كاذب بيشتر خواهند شد .

اختصاصيت آزمايش :

توانايي يك آزمايش در تشخيص حيوانات آلوده را اختصاصيت آن آزمايش مي نامند . اختصاصيت يك آزمايش (Sp) عبارتست از احتمال منفي بودن نتيجه تست در حيواناتي كه عاري از آلودگي هستند . اختصاصيت يك آزمايش ، به صورت درصد حيوانات غير آلوده اي كه نتيجه آزمايش آنها منفي است (d/b+d) بيان مي شود . با كاسته شدن از اختصاصيت يك آزمايش ، پاسخ هاي مثبت كاذب بيشتري مشاهده مي شود .
ميزان حساسيت و اختصاصيت هر آزمايش مخصوص با انجام آن آزمايش در دو جمعيت مستقل دامي مشخص مي شود و هر چه جمعيت دامي مورد مطالعه بيشتر باشد ، اطمينان ما در مورد آن آزمايش بيشتر خواهد شد . براي سنجش ميزان حساسيت ، تعداد زيادي از حيوانات آلوده به ميكروب عامل بيماري را مورد آزمايش قرار مي دهيم و براي سنجش اختصاصيت آزمايش ، از جمعيت برابري از حيوانات كه عاري از آلودگي هستند استفاده مي كنيم .
به دليل اين كه آزمايش هاي فعلي تشخيص بيماري يون قادر نيستند آلودگي حيوانات را در مراحل اول و دوم مشخص كنند ، بنابراين حساسيت اين آزمايش ها تنها بر پايه آلودگي حقيقي گله مشخص مي شود . ميزان حساسيت و اختصاصيت آزمايش ها ، مي تواند توسط بعضي از عوامل تحت تاثير قرار گيرد . هنگامي كه حيوانات مورد آزمايش در مراحل اوليه آلودگي باشند ، حساسيت آزمايش بسيار كم خواهد شد . در مقابل ، اگر حيوانات مورد بررسي در مرحله چهار آلودگي باشند ،حساسيت آزمايش به 100 درصد خواهد رسيد . اختصاصيت آزمايش ها ، توسط واكنش هاي متقاطع ساير ميكروارگانيسم هاي مشابه و يا آلودگي اتفاقي نمونه ها به مايكوباكتريوم اويوم زير گونه پاراتوبركلوزيس تحت تاثير قرار مي گيرد .
رابطه بين حساسيت و اختصاصيت آزمايش ها ، بصورت يك قاعده كلي است و اين دو معيار ، با يكديگر رابطه معكوس دارند . در آزمايش هايي مانند الايزا ، نتيجه آزمايش ، بصورت كم تا زياد بيان مي شود . در نقطه خاصي از اين رشته ، نتيجه آزمايش به صورت مثبت قلمداد مي شود . بطور مثال ، قطع جرياني كه نشان دهنده سيگنال است ، نمايانگر وجود پادتن عليه ميكروب عامل بيماري يون است كه در جريان ، اختلال ايجاد نموده است . براي مقايسه حساسيت و اختصاصيت ، اين دو معيار را بر اساس نقطه قطع جريان مشخص نموده اند . اگر نقطه قطع جريان به سمت بالا رود ، باعث افزايش حساسيت و در نتيجه آن كاسته شدن از اختصاصيت آزمايش مي شود . با توجه به اين كه دقت آزمايش ها هيچ گاه 100 درصد نيست ، بايد نتايج آزمايش ها مورد تفسير و بررسي قرار گيرد . تاريخچه گله ، نشانه هاي كلينيكي و ميزان تخمين زده شده نتيجه آزمايش از جمله مواردي هستند كه بوسيله آنها مي توان نتيجه يك آزمايش را مورد بررسي قرار داد . عليرغم وجود نقصان هاي موجود در آزمايش هاي تشخيصي فعلي ، اين آزمايش ها از ابزار هاي سودمندي هستند كه بوسيله آنها مي توان روش هاي مديريتي و كنترلي در گله را بهتر نمود . نكته مثبت اين آزمايش ها اين است كه ما ، بواسطه استفاده از اين آزمايش ها بسياري از بيماري هاي ديگر موجود در گله را مانند مايكوباكتريوم بوويس عامل سل گاوي را نيز يا كنترل نموده و يا از گله حذف كرده ايم .

تخمين درصدي از حيوانات گله كه واقعا ً آلوده هستند :

براي جلوگيري و كنترل بيماري در گله ، دانستن درصد حيوانات آلوده در گله ، بطور مثال آگاهي ا